健康所系，性命相托。

    当我步入神圣医学学府的时刻，谨庄严宣誓：

    我志愿献身医学，热爱祖国，忠于人民，恪守医德，尊师守纪，刻苦钻研，孜孜不倦，精益求精，全面发展。

    我决心竭尽全力除人类之病痛，助健康之完美，维护医术的圣洁与荣誉。救死扶伤，不辞艰辛，执著追求，为祖国医药卫生事业的发展和人类身心健康奋斗终生。

来源：国家医学考试网
 

医神阿波罗、埃斯克雷彼斯及天地诸神作证，我——希波克拉底发誓：

我愿以自身判断力所及，遵守这一誓约。凡教给我医术的人，我应像尊敬自己的父母一样，尊敬他。作为终身尊重的对象及朋友，授给我医术的恩师一旦发生危急情况，我一定接济他。把恩师的儿女当成我希波克拉底的兄弟姐妹；如果恩师的儿女愿意从医，我一定无条件地传授，更不收取任何费用。对于我所拥有的医术，无论是能以口头表达的还是可书写的，都要传授给我的儿女，传授给恩师的儿女和发誓遵守本誓言的学生；除此三种情况外，不再传给别人。

我愿在我的判断力所及的范围内，尽我的能力，遵守为病人谋利益的道德原则，并杜绝一切堕落及害人的行为。我不得将有害的药品给予他人，也不指导他人服用有害药品，更不答应他人使用有害药物的请求。尤其不施行给妇女堕胎的手术。我志愿以纯洁与神圣的精神终身行医。因我没有治疗结石病的专长，不宜承担此项手术，有需要治疗的，我就将他介绍给治疗结石的专家。

无论到了什么地方，也无论需诊治的病人是男是女、是自由民是奴婢，对他们我一视同仁，为他们谋幸福是我惟一的目的。我要检点自己的行为举止，不做各种害人的劣行，尤其不做诱奸女病人或病人眷属的缺德事。在治病过程中，凡我所见所闻，不论与行医业务有否直接关系，凡我认为要保密的事项坚决不予泄漏。

我遵守以上誓言，目的在于让医神阿波罗、埃斯克雷彼斯及天地诸神赐给我生命与医术上的无上光荣；一旦我违背了自己的誓言，请求天地诸神给我最严厉的惩罚！

 

I swear by Apollo Physician by Asclepius, by Health, by Panacea, and by all the gods and goddesses, making them my witnesses, that I will carry out, according to my ability and judgment, this oath and this indenture.
To hold my teacher in this art equal to my own parents; to make him partner in my livelihood; when he is in need of money to share mine with him; to consider his family as my own brothers, and to teach them this art, if they want learn it, without fee or indenture.

To impart precept, oral instruction, and all other instruction to my own son, the sons of my teacher, and to indentures pupils who have taken the physician's oath, but to nobody else.
 I will use treatment to help the sick according to my ability and judgment, but never with a view to injury and wrongdoing. Neither will I administer a poison to anybody when asked to do so, nor will I suggest such a course.

Similarly, I will not give to a woman a pessary to cause abortion. But I will keep pure and holy both my life and my art.

I will not use the knife, not even, verily, on sufferers from stone, but I will give place to such as are craftsmen therein, Into whatsoever houses I enter, I will enter to help the sick, and I will abstain from all intentional wrongdoing and harm, especially from abusing the bodies of man or woman, bond or free.
And whatsoever I shall see or hear in the course of my profession, as well as outside my profession in my intercourse with men, if it be what should not be published abroad, I will never divulge, holding such things to be holy secrets.

Now, if I carry out this oath, and break it not, may I gain forever reputation among all men for my life and for my art; but if I transgress it and forswear myself, may the opposite befall me.

来源：国家医学考试网
 

自被批准从事医药工作之日起，就要为人道主义贡献一生。

对恩师要表示尊敬和感谢。

要以良心和尊严来从事医学实践。

要把患者的健康和生命，作为首要关心的事。

严守患者的一切秘密。

维护医务职业的荣誉和崇高传统。

把同行当作自己的兄弟。

不以种族、宗教、国籍、政党、政治派别如何及社会地位的高低来区别对待患者。

对人类自其生命受胎之时始，就给予至高无上的尊重。

无论在任何压力下，也不能滥用自己的知识而违背人道。

 

Declaration of Geneva

At the Time of Being Admitted as a Member of the Medical Profession:

I solemnly pledge myself to consecrate my life to the service of humanity.

I will give to my teachers the respect and gratitude which is their due;

I will practice my profession with conscience and dignity;

The health of my patient will be my first consideration;

I will respect the secrets which are confided in me;

I will maintain by all the means in my power, the honor and the noble traditions of the medical profession;

My colleagues will be my brothers;

I will not permit considerations of religion, nationality, race, party politics or social standing to intervene between my duty and my patient;

I will maintain the utmost respect for human life, from the time of conception; even under threat, I will not use my medical knowledge contrary to the laws of humanity.

I make these promises solemnly, freely, and upon my honor. 

颅内高压综合征不是一个独立的疾病，它是由于脑血管病、颅内肿瘤或炎症等一些颅内疾患，引起脑脊液分泌增多，脑血液循环障碍，脑组织水肿，脑内压增高(卧位超过19.6千帕)所导致的一系列临床症状。主要表现是：

　　(1)头痛　是颅内高压的一个特征症状，是由于颅内敏感神经，如脑膜、血管神经受到刺激所引起的。多为持续性疼痛。头痛部位多位于额部或双侧颞部，并常牵涉到枕部和颈部，而曲颈活动，剧烈咳嗽，或用力大便时，可使疼痛加重。

　　(2)呕吐　多与头痛同时发生，常为喷射性反复发生，不伴恶心，若丘脑下部受损可出现呕血。呕吐发生的原因，一般认为是颅内高压，延脑的呕吐中枢受到刺激所致。

　　(3)视乳头水肿　是颅内高压的又一重要体征，主要是因视网膜静脉向颅内回流受阻所引起。临床表现，早期视乳头充血，边界不清，中心凹陷，隐约欠清晰。当颅内压继续升高时可见视乳头水肿，中心凹陷消失，视网膜可见点状出血。视乳头水肿早期，视力和视野多不受影响。长期颅内高压可发生视神经萎缩，最终导致失明。

　　(4)意识障碍　意识障碍的程度与颅内高压的轻重有关。轻者病人表现为表情呆滞，反应迟钝，昏睡；严重时可发生昏迷。急性脑血管病出现意识障碍，常见于脑出血和大面积脑梗塞，是因脑组织受压或缺血坏死，脑脊液回流受阻，颅内压持续增高所致。一般预后较差，应注意积极防治。

　　(5)呼吸障碍　轻者病人表现呼吸节律和幅度发生紊乱，呼吸不规则，每次呼吸的深浅度不等，频率欠均匀。严重时出现呼吸衰竭，病人表现周期性呼吸、双吸气、抽泣样呼吸等，若抢救不及时，会很快死亡。呼吸衰竭的发生机制，是因脑水肿，颅内高压，损害了脑干和延脑的呼吸中枢所引起的。

　　(6)癫痫样发作　颅内高压可使局部脑组织软化坏死，病灶周围的神经细胞发生病理性放电所致癫痫样发作，病人表现突然抽搐，全身挺直或病灶对侧肢体阵发性痉挛收缩。但当颅内压降低后，症状也可得到暂时缓解。

　　总之，对颅内高压综合征要高度警惕，密切观察病情，作到及时发现，及时治疗。

窦性心律：
P波规律出现，后面跟有QRS波群，P-P间隔相等。通常P波的振幅在II导联和V1导联最高，II、III、avF导联P波直立。
正常窦性心律时心率在60-100次/分，心率高于100次/分称窦性心动过速，心率低于60次/分时称窦性心动过缓，P-P或R-R间期的差值大于0.12s时称为窦性心律不齐。

冠状窦心律：
P波规律出现，但在II、III、avF导联P波倒置。此类心律起源点多在冠状静脉窦。

心房内游走心律：
P波形态各不相同， P波直立和倒置出现在同一导联内。

房性心动过速：
P"波形态与窦性P波不同，心率常在100-150次/分之间。其中P"波形态各异，P"- P"、 P"-R不等者称为"多形性"或"紊乱性"房性心动过速，常见于有严重肺动脉疾患的病人（下图为多形性房速）。

心房扑动：
心房波动规则，P波消失，代之以"F"波，"F"波在II、III、avF导联清晰，波间匀齐相差不超过0.02s，"F"波频率在240-430bpm，房室传导比例不定，常合并有不同程度的房室阻滞

心房颤动：
P波消失，代之以"f"波，"f"波在V1和II导联较易识别，"f"波频率在350-600bpm ，RR间期绝对不等，若合并完全性房室阻滞时可出现RR间期相等

交界性心律：
起搏点在房室结，下传心室同时逆传心房，P波在II、III、avF导联常倒置，可以埋藏于QRS波中而不可见，也可能跟随在QRS波之后（如下图），QRS波与窦性心律时相似。结性心律的频率通常在40-55bpm，快于此范围时称交界性心动过速。

阵发性室上性心动过速：
有房室折返和房室结折返两种，前者发生机制为房室旁路参与，后者发生机制为房室结双径路。心率通常在160-220bpm。P波规律出现，可以埋藏于QRS波中而不可见，也可能跟随在QRS波之后（多为倒置的逆行P波，如右图）。QRS波可稍有不齐

氨基酸  三字标  一字标  全名
 
丙氨酸  Aln   A  Alanine
精氨酸  Arg  R  Arginine
天冬氨酸  Asn  N  Asparagine
天冬酰胺  Asp  D  Aspardic
半胱氨酸  Cys  C  Cysteine
谷胱酰胺  Glu  E  Gluetamic
谷氨酸  Gln  Q  Gluetamine
甘氨酸  Gly  G  Glycine
组氨酸  His  H  Histidine
异亮氨酸  Ile  I  Isoleucine
亮氨酸  Leu  L  Leucine
赖氨酸  Lys  K  Lysine
蛋氨酸  Met  M  Methionine
苯丙氨酸  Phe  F  Fenylalanine
脯氨酸  Pro  P  Proline
丝氨酸  Ser  S  Serine
苏氨酸  The  T  Threonine
色氨酸  Trp  W  Tryptophan
酪氨酸  Tyr  Y  Tyrosine
缬氨酸  Val  V  Valine

本文摘自网络，当时出于个人收藏目的，未保存作者名字，现在已无处可查，望原创见谅。
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
【材料】
1、LB；2、甘油；3、保存管

【方法】
保藏液体培养基中生长的培养物
1、1.5ml培养物中加0.5ml灭菌的60%甘油[经15psi（1.05kg/cm2）20min灭菌]。
2、用旋涡混合器混合确保甘油分散均匀。
3、将培养物转移到已贴好标签并带有螺盖和空气密封圈的保存管内。
4、将培养物在乙醇-干冰或液氮中冻结，再置-70℃长期保藏。
5、菌种复苏时，用灭菌的接种环刮拭冻结的培养物表面，立即将黏附在接种环上的细菌划在含有适当抗生素的LB琼脂平板表面。将冻结的培养物放回-70℃冻存，平板于37℃培养过夜。从-70℃以下冰箱中取出一份冻存的感受态细菌，于室温慢慢融化，立即放在冰上10min

 

保藏琼指平板上生长的培养物
1、刮下琼脂平板表面生长的细菌。转移至含2mlLB培养基的无菌试管中，再加等体积含30%甘油的LB。
2、用旋涡混合器混合确保甘油分散均匀。
3、将含甘油的培养物分装到带有螺盖和空气密封圈的保存管内，按上述方法冻结。
 

文章出处：医学知识 www.hope.net.cn

本文摘自网络，当时出于个人收藏目的，未保存作者名字，现在已无处可查，望原创见谅。
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。
DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。

2.引物长度一般在15~30碱基之间。
引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。

3.引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。
GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效启动温度，一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4（G+C）+2（A+T）估计引物的Tm值，则有效引物的Tm为55~80℃，其Tm值最好接近72℃以使复性条件最佳。

4.引物3′端要避开密码子的第3位。
如扩增编码区域，引物3′端不要终止于密码子的第3位，因密码子的第3位易发生简并，会影响扩增的特异性与效率。

5.引物3′端不能选择A，最好选择T。
引物3′端错配时，不同碱基引发效率存在着很大的差异，当末位的碱基为A时，即使在错配的情况下，也能有引发链的合成，而当末位链为T时，错配的引发效率大大降低，G、C错配的引发效率介于A、T之间，所以3′端最好选择T。

6. 碱基要随机分布。
引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错误引发（False priming）。降低引物与模板相似性的一种方法是，引物中四种碱基的分布最好是随机的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C，因这样会使引物在GC富集序列区错误引发。

7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。
引物自身不应存在互补序列，否则引物自身会折叠成发夹结构（Hairpin）使引物本身复性。这种二级结构会因空间位阻而影响引物与模板的复性结合。引物自身不能有连续4个碱基的互补。
两引物之间也不应具有互补性，尤其应避免3′ 端的互补重叠以防止引物二聚体（Dimer与Cross dimer）的形成。引物之间不能有连续4个碱基的互补。
引物二聚体及发夹结构如果不可避免的话，应尽量使其△G值不要过高（应小于4.5kcal/mol）。否则易导致产生引物二聚体带，并且降低引物有效浓度而使PCR 反应不能正常进行。

8. 引物5′ 端和中间△G值应该相对较高，而3′ 端△G值较低。
△G值是指DNA 双链形成所需的自由能，它反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性，△G值越大，则双链越稳定。应当选用5′ 端和中间△G值相对较高，而3′ 端△G值较低（绝对值不超过9）的引物。引物3′ 端的△G 值过高，容易在错配位点形成双链结构并引发DNA 聚合反应。（不同位置的△G值可以用Oligo 6软件进行分析）

 

9.引物的5′端可以修饰，而3′端不可修饰。
引物的5′ 端决定着PCR产物的长度，它对扩增特异性影响不大。因此，可以被修饰而不影响扩增的特异性。引物5′ 端修饰包括：加酶切位点；标记生物素、荧光、地高辛、Eu3+等；引入蛋白质结合DNA序列；引入点突变、插入突变、缺失突变序列；引入启动子序列等。
引物的延伸是从3′ 端开始的，不能进行任何修饰。3′ 端也不能有形成任何二级结构可能。

10. 扩增产物的单链不能形成二级结构。
某些引物无效的主要原因是扩增产物单链二级结构的影响，选择扩增片段时最好避开二级结构区域。用有关软件（比如RNAstructure）可以预测估计mRNA的稳定二级结构，有助于选择模板。实验表明，待扩区域自由能（△G°）小于58.6l kJ/mol时，扩增往往不能成功。若不能避开这一区域时，用7-deaza-2′-脱氧GTP取代dGTP对扩增的成功是有帮助的。

11. 引物应具有特异性。
引物设计完成以后，应对其进行BLAST检测。如果与其它基因不具有互补性，就可以进行下一步的实验了。
值得一提的是，各种模板的引物设计难度不一。有的模板本身条件比较困难，例如GC含量偏高或偏低，导致找不到各种指标都十分合适的引物；用作克隆目的的PCR，因为产物序列相对固定，引物设计的选择自由度较低。在这种情况只能退而求其次，尽量去满足条件。

做Real Time时,用于SYBR Green I法时的一对引物与一般PCR的引物,在引物设计上所要求的参数是不同的。引物设计的要求：
1)避免重复碱基，尤其是G.
2)Tm=58-60度。
3）GC=30-80%.
4)3\'端最后5个碱基内不能有多于2个的G或C.
5)正向引物与探针离得越近越好，但不能重叠。
6)PCR扩增产物长度：引物的产物大小不要太大，一般在80-250bp之间都可；80～150 bp最为合适（可以延长至300 bp）。
7)引物的退火温度要高，一般要在60度以上；

要特别注意避免引物二聚体和非特异性扩增的存在。

而且引物设计时应该考虑到引物要有不受基因组DNA污染影响的能力，即引物应该跨外显子，最好是引物能跨外显子的接头区，这样可以更有效的不受基因组DNA污染的影响。

至于设计软件，PRIMER3,PRIMER5,PRIMER EXPRESS都应该可以的。

做染料法最关键的就是寻找到合适的引物和做污染的预防工作。对于引物，你要有从一大堆引物中挑出一两个能用的引物的思想准备---寻找合适的引物非常不容易。

关于BLAST的作用应该是通过比对，发现你所设计的这个引物，在已经发现并在GENEBANK中公开的不物种基因序列当中，除了和你的目标基因之外，还有没有和其他物种或其他序列当中存在相同的序列，如和你的目标序列之外的序列相同的序列，则可能扩出其他序列的产物，那么这个引物的特异性就很差，从而不能用。